Cantitate/Preț
Produs

Plant Gene Transfer and Expression Protocols: Methods in Molecular Biology, cartea 49

Autor Heddwyn Jones
en Limba Engleză Paperback – 21 aug 2013

Observăm că evoluția biotehnologiei vegetale a depășit rapid stadiul de simplă curiozitate academică, transformându-se într-un instrument esențial pentru securitatea alimentară și industria farmaceutică. Volumul Plant Gene Transfer and Expression Protocols, editat de Heddwyn Jones, reflectă momentul în care tehnologia ADN recombinat a început să permită nu doar înțelegerea proceselor fiziologice, ci și transformarea plantelor în adevărate fabrici biochimice capabile să producă anticorpi umani sau polimeri industriali. Lucrarea este concepută ca un ghid metodologic riguros, adresat cercetătorilor care au nevoie de proceduri reproductibile pentru manipularea genomului vegetal.

Structura cărții urmărește o progresie logică, de la vectorii biologici la metodele fizice de inserție. Primele capitole explorează în detaliu transformarea mediată de Agrobacterium tumefaciens și Agrobacterium rhizogenes, oferind protocoale specifice pentru organisme model precum Arabidopsis thaliana. Urmează secțiunea dedicată transferului direct, unde sunt explicate tehnici de vârf precum bombardarea cu microproiectile pentru cereale (orz) și electroporarea protoplastelor. Credem că valoarea practică este sporită de capitolele finale dedicate sistemelor de gene raportoare, cum este sistemul GUS, și metodelor de caracterizare moleculară prin Southern Analysis.

Această lucrare completează perspectiva oferită de Plant Genetic Engineering de Donald Grierson. În timp ce volumul lui Grierson se concentrează pe fundamentele teoretice și impactul asupra ameliorării plantelor, manualul de față adaugă rigoarea tehnică a protocoalelor pas-cu-pas necesare în laborator. De asemenea, se distinge de Recombinant Proteins from Plants prin acoperirea mai largă a metodelor de transfer, nu doar a sistemelor de expresie pentru proteine heterologe. Este o resursă care documentează standardele tehnice ce au pus bazele biotehnologiei moderne.

Citește tot Restrânge

Din seria Methods in Molecular Biology

Carte tipărită la comandă

Livrare economică 26 iunie-10 iulie


Specificații

ISBN-13: 9781489940599
ISBN-10: 1489940596
Pagini: 500
Ilustrații: XV, 466 p. 118 illus.
Dimensiuni: 152 x 229 x 26 mm
Greutate: 0.66 kg
Ediția:1995
Editura: Humana Press Inc.
Colecția Humana
Seria Methods in Molecular Biology

Locul publicării:Totowa, NJ, United States

Public țintă

Research

De ce să citești această carte

Recomandăm această lucrare cercetătorilor din domeniul biologiei moleculare vegetale care caută o bază solidă de protocoale verificate. Cititorul câștigă acces la metodologii detaliate pentru transformarea genetică a diverselor specii, de la tutun la cereale, și la tehnici esențiale de analiză a expresiei genice. Este un instrument de lucru indispensabil pentru laboratoarele care vizează optimizarea productivității agricole sau producția de compuși biochimici de interes industrial.


Descriere scurtă

The development of recombinant DNA technology and methods for transferring recombinant genes into plants has brought about significant advances in plant science. First, it has allowed investigation, using reporter genes, into the transcriptional regulation of plant genes—a key to the under­ standing of the biochemical basis of growth and development in plants. Second, gene transfer technology has facilitated the molecular cloning, by tagging genomic sequences, of important genes (e. g. , homeotic genes) whose gene products control the normal pattern of growth and differentia­ tion of plants. Third, overproducing foreign or endogenous proteins in plants can often lead to a better understanding of biochemical and physiological processes. Fourth, gene transfer technology has allowed the improvement of plant agricultural productivity. For example, plants have been engineered with improved viral resistance or the ability to withstand herbicide attack, therefore allowing a more effective use of herbicides to kill weeds. Fifth, there have been recent successes that demonstrate the potential use of plants as biotechnological chemical factories. For example, it is possible to use plants in the production of human antibodies and antigens of medical importance. It has been demonstrated recently that plants can be engineered to produce modified oils and even plastics! This paves the way to redirect agriculture from the production of surplus foods to the production of bio­ technological products of industrial importance.

Cuprins

Agrobacterium-Mediated Transformation.- Tools for Expressing Foreign Genes in Plants.- of Cloning Plasmids into Agrobacterium tumefaciens.- Leaf Disk Transformation Using Agrobacterium tumefaciens-Expression of Heterologous Genes in Tobacco.- Agobacterium rhizogenes as a Vector for Transforming Higher Plants.- Agrobacterium-Mediated Transformation of Arabidopsis thaliana.- Agrobacterium -Mediated Transfer of Geminiviruses to Plant Tissues.- Direct Gene Transfer.- Stable Transformation of Barley via Direct DNA Uptake.- Gene Transfer into Plant Protoplasts by Electroporation.- Transformation of Cereals by Microprojectile Bombardment of Immature Inflorescence and Scutellum Tissues.- Use of Reporter Genes.- The ?-Glucuronidase (gus) Reporter Gene System.- Chloramphenicol Acetyl Transferase Assay.- NPTII Assays for Measuring Gene Expression and Enzyme Activity in Transgenic Plants.- Study of Gene Organization by Southern Blotting and Inverse PCR.- Gene Characterization by Southern Analysis.- Isolation and Characterization of Plant Genomic DNA Sequences via (Inverse) PCR Amplification.- RNA Techniques for Studying Gene Expression.- Isolation of Whole Cell (Total) RNA.- Poly(A)+RNA Isolation.- In Vitro Translation.- Northern Analysis and Nucleic Acid Probes.- Nuclear “Run-On” Transcription Assays.- RNase A/T1 Protection Assay.- Primer Extension Assay.- Applications of RT-PCR.- In Vitro Transcription of Class II Promoters in Higher Plants.- Analysis of Plant Gene Expression by Reverse Transcription-PCR.- In Situ Hybridization to Plant Tissue Sections.- Xenopus Oocytes as a Heterologous Expression System.- Heterologous Expression in Yeast.- Techniques for Studying Chloroplast Gene Expression.- The Isolation of Intact Chloroplasts.- In Vitro Protein Import by IsolatedChloroplasts.- Targeting of Foreign Proteins to the Chloroplast.- Techniques for Studying Mitochondrial Gene Expression.- Isolation of Mitochondria.- Mitochondrial Nucleic Acid Purification and Analysis.- In organello Protein Synthesis.- Immunological Detection of Proteins.- Separation of Plant Proteins by Electrophoresis.- Western Blotting Analysis.- ELISA Detection of Foreign Proteins.- Immunocytochemical Localization of Proteins.

Recenzii

The chapters were written by outstanding scientists and [the book] can be recommended to any laboratory working with plants, providing tips and alternatives in case of problems. -Journal of Plant Physiology