La mastitis bovina es la enfermedad m s frecuente y costosa para la explotaci n lechera. La mayor a de los casos son causados por bacterias de los g neros Staphylococcus y Streptococcus siendo Streptococcus uberis el principal pat geno ambiental. La ineficacia de las medidas tradicionales para disminuir la tasa de infecci n ha dirigido la b squeda al desarrollo de vacunas para complementar las medidas de control existentes. Las prote nas PauA y SUAM podr an ser empleadas como ant genos para el desarrollo de una subunidad vacunal. El presente trabajo estuvo dirigido a la obtenci n de mutantes de S. uberis deficientes en los genes pauA y sua mediante mutag nesis sitio-dirigida y la caracterizaci n de dichas mutantes. Para la obtenci n de mutantes se emple el uso combinado de dos tipos de vectores con replicaci n condicional derivados del pWV01: pORI280 y pG+host3. Fragmentos amplificados de los genes pauA y sua se clonaron en el pl smido pORI280 y se recuperaron en la cepa E. coli EC1000 RepA+. Los pl smidos recombinantes se emplearon para transformar la cepa S. uberis seleccionada y obtener mutantes. Se describe aqu una estrategia distinta en la obtenci n de mutantes en S. uberis.